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                  猴结核分枝杆菌抗体IgGELISA试剂盒使用说明书

                  • 所属分类:其它资料

                    上传时间:2017/10/17

                  • 文件类型:jpg

                    文件大小:22 KB

                  • 浏?#26469;?#25968;:3652次

                    下载次数:357次

                    需要积分:0积分

                  • 上传公司:上海谷研实业有限公司进入展台
                  • 标签:试剂盒  

                  资料简介

                  实验原理

                  本试剂盒应用双抗原夹心法测定标本中猴结核分枝杆菌抗体 IgG(M.tuberculosis-IgG)表达。用纯化的抗原包被微孔板,制成固相抗原,可与样?#20998;?#32467;核分枝杆菌抗体IgG(M.tuberculosis-IgG)相结合,经洗涤除去未结合的抗原和其他成分后再与 HRP 标记的抗原结合,形成抗原-抗体-酶标抗原复合物,经过彻底洗涤后加底物 TMB 显色。TMB 在 HRP 酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。用酶标仪在 450nm 波长下测定吸光度(OD 值),与 CUTOFF 值相比较,从而判定标本中猴结核分枝杆菌抗体
                  IgG(M.tuberculosis-IgG)的存在与否。

                  试剂盒组成

                  1
                  30 倍浓缩洗涤液
                  20ml×1 瓶
                  7
                  终止液
                  6ml×1 瓶

                  2
                  酶标试剂
                  6ml×1 瓶
                  8
                  阳性对照
                  0.5ml×1 瓶

                  3
                  酶标包被板
                  12 孔×8 条
                  9
                  阴性对照
                  0.5ml×1 瓶

                  4
                  样品稀释液
                  6ml×1 瓶
                  10
                  说明书
                  1 份

                  5
                  显色剂 A 液
                  6ml×1 瓶
                  11
                  封板膜
                  2 张

                  6
                  显色剂 B 液
                  6ml×1/瓶
                  12
                  密封袋
                  1 个

                  标本要求

                  1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能

                  马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融2.不能检测含 NaN3 的样品,因 NaN3 抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。

                  操作步骤

                  编号:将样品对应微孔按序编号,每板应设阴性对照 2 孔、阳性对照 2 孔、空白对照 1 孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)

                  加样:分别在阴、阳性对照孔中加入阴性对照、阳性对照 50µl。然后在待测样品孔先加样品稀释液 40µl,然后再加待测样品 10µl。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀,

                  温育:用封板膜封板后置 37℃温育 30 分钟。

                  配液:将 30 倍浓缩洗涤液用蒸馏水 30 倍稀释后备用

                  洗涤?#30418;?#24515;?#19994;?#23553;板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置 30 秒后弃去,如此重复 5 次,拍干。


                  ?#29992;福好?#23380;加入酶标试剂 50µl,空白孔除外。

                  温育:操作同 3。

                  洗涤:操作同 5。

                  显色?#22909;?#23380;先加入显色剂 A50µl,再加入显色剂 B50µl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色

                  15 分钟.

                  终止?#22909;?#23380;加终止液 50µl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。

                  测定:以空白空调零,450nm 波长依序测量各孔的吸光度(OD 值)。 测定应在加终止液后 15 分钟以内进?#23567;?br />

                  操作程序总结:

                  计算和结果判定:

                  试验有效性:阳性对照孔平均值≥1.00; 阴性对照平均值≤0.10临界值(CUT OFF)计算:临界值=阴性对照孔平均值+0.15

                  阴 性 判 定 : 样 品 OD 值 < 临 界 值 ( CUT OFF ) 者 为 结 核 分 枝 杆 菌 抗 体

                  IgG(M.tuberculosis-IgG)阴性阳 性 判 定 : 样 品 OD 值 ≥ 临 界 值 ( CUT OFF ) 者 为 结 核 分 枝 杆 菌 抗 体


                  IgG(M.tuberculosis-IgG)阳性。

                  注意事项

                  1.操作严格按照说明书进行,本试剂不同批号组分不得混用。

                  2.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡 15-30 分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未

                  用完,板条应装入密封袋中保存。3.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。4. 封板膜只限一次性使用,?#21592;?#20813;交叉污?#23613;?br />
                  5.底物请避光保存。

                  6.试验结果判定必须以酶标仪读数为准,使用双波长检测时,参考波长为 630nm

                  7.所有样品,洗涤液和各种废弃物?#21152;?#25353;传染物处理。终止液为 2M 的硫酸,使用时必须注意安全。

                  保存条件及有效期

                  1.试剂盒保存?#28023;?-8℃。

                  2.有效期:6 个月

                  香茅醇 进口,特价 Citronellol  含量: >95%
                  香叶木素   进口/国产 Diosmetin 含量: ≥98%  
                  辛可尼丁   现货供应 Cinchonidine 含量: ≥98%  
                  辛可宁   特价促销 Cinchonine 含量: ≥98%  
                  新穿心莲内酯苷元 进口/国产 ANDROGRAPANIN                                                                                     含量: >95%
                  新绿原酸 进口/国产 5-caffeoylquinic Acid 含量: ≥97%
                  雄烯二酮 进口,特价 Androstenedione 含量: ≥98%  
                  绣线?#32773;?nbsp;进口,特价 Quercetin 4'-glucoside 含量: >98%
                  雪上一枝蒿乙素 进口/国产 Bullatine B 含量: ≥98%  
                  雪松醇 特价促销 cedrol,cedar camphor,cypress camphor 含量: ≥97%
                   

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